scFv是由抗体重链可变区和轻链可变区通过15-20个氨基酸的短肽毗连而成，属于小分子基因工程抗体 。scFv保存了完整抗原活性，且具有穿透力强、体内半衰期短、免疫原性低、可在原核细胞系统表达以及易于举行基因工程操作等优点，在医学和生物手艺领域中有着普遍的应用，这些应用包括细胞治疗、疾病诊断、药物递送等 。BET9登录网址开发了一系列高质量的Anti-scFv抗体，助力您在基于scFv的抗体药、双特异性抗体及CAR-T等领域的研究 。
图1：全长抗体及scFv结构图
MonoRab?兔单抗手艺包管对scFv的高亲和力Kd＜10-9 M ；
在较低滴度下可通过流式细胞术准确检测CAR-T细胞阳性率 ；可检测到溶液中较低含量的scFv ；
重组生产的单克隆抗体包管最优的批间差 ；
对未转染CAR的T细胞、不表达scFv的细胞体现出极低的非特异性信号 ；
团结scFv后，不影响scFv对其靶抗原的团结 ；
BET9登录网址的Anti-scFv抗体对基于scFv的CAR-T细胞体现出超高的特异性 。实验效果显示差别稀释比例的Anti-scFv抗体均能准确检测CAR-T细胞的阳性率，且该抗体对未被编辑的T细胞体现出极低的非特异性团结，因此可用于CAR-T细胞的表征 。
图2：Anti-scFv抗体表征基于scFv的CAR-T细胞
使用差别稀释比例（1：50-1：500）的MonoRab? Rabbit Anti-scFv Cocktail [iFluor 647] (GenScript, A02288) 检测相同的CAR-T细胞 。MonoRab? Rabbit IgG Control [iFluor 647] (Whole Molecule), mAb (GenScript, A02026)对CAR-T细胞的染色以及A02288对na?ve T细胞的染色作为阴性比照 。
流式细胞术效果显示Anti-scFv抗体相比于Protein L和Anti-Fab抗体具有更优的细胞分群效果和更高的检出率 。
图3：基于scFv的CAR-T细胞表征工具较量
使用相同浓度的MonoRab? Rabbit Anti-scFv Cocktail (GenScript, A02282) 、FITC-Labeled Recombinant Protein L 和 Alexa Fluor? 647 AffiniPure Goat Anti-Human IgG, F(ab’)2 检测相同数目和结构的CAR-T细胞 。其中，Anti-scFv抗体的荧光信号由Alexa Fluor? 488-Labeled Goat Anti-Rabbit IgG提供 。
Anti-scFv抗体可用于检测人源化scFv、鼠源scFv和双特异性抗体对其靶卵白的团结能力 。
图4：Anti-scFv抗体检测scFv/双特异性抗体对其靶抗原的团结曲线
抗原包被浓度为1 μg/mL ；scFv浓度从1.37 ng/mL到1000 ng/mL ；A02282浓度为1 μg/mL ；酶标二抗使用Mouse Anti-Rabbit IgG Fc Antibody (14H9H10) [HRP], mAb(GenScript, A01856)，稀释比例为1：20000 。靶点及scFv信息如下：Humanized scFv#1:anti-VEGF scFv; Antigen#1:VEGF; Mouse scFv#2: anti-BCMA scFv; Antigen#2: BCMA; Bispecific Antibody#3: anti-CD19×anti-CD3，BiTE; Antigen#3: CD3.
流式细胞术效果显示Anti-scFv抗体对团结scFv的细胞体现出较高的特异性信号，对未团结scFv的细胞体现出较低的非特异性信号，因此可用于检测scFv对其靶细胞的团结能力 。
图5：Anti-scFv抗体检测scFv对其靶细胞的团结活性
使用MonoRab? Rabbit Anti-scFv Cocktail [FITC](GenScript, A02284)剖析anti-CD20抗体对Raji细胞的团结能力 。其中蓝色实线代表未染色细胞，红色实线代表仅加入A02284的细胞，绿色实线代表加入anti-CD20 scFv和A02284的细胞 。
ELISA效果显示MonoRab? Rabbit Anti-scFv Cocktail (GenScript, A02282) 可特异性识别差别泉源、差别毗连顺序（VH-VL或VL-VH）、差别linker的scFv以及差别形式的基于scFv的双特异性抗体，如BiTE, IgG(H)-(scFv)2, (scFv)2-(H)IgG, scFv-Fab-Fc等 。
图6：Anti-scFv抗体对差别序列scFv和双特异性抗体的团结曲线
差别泉源、差别毗连顺序（VH-VL或VL-VH）、差别linker的scFv或差别形式的双特异性抗体以1 μg/mL的浓度包被在酶标板上 ；A02282浓度从0.017 ng/mL到1000 ng/mL ；酶标二抗使用Mouse Anti-Rabbit IgG Fc Antibody (14H9H10) [HRP], mAb(GenScript, A01856)，稀释比例为1：20000 。
生物膜干预手艺（BLI）效果显示MonoRab? Rabbit Anti-scFv Cocktail (GenScript, A02282)对差别泉源、差别毗连顺序（VH-VL或VL-VH）、差别linker的scFv以及差别形式的基于scFv的双特异性抗体具有较高的亲和力 。
图7：BLI检测Anti-scFv抗体对差别序列scFv和双特异性抗体的亲和力
WB效果显示MonoRab? Rabbit Anti-scFv Cocktail (GenScript, A02282)对差别泉源scFv及双特异性抗体BiTE均具有较高的迅速度 。
图8：Western Blot检测Anti-scFv抗体对差别泉源scFv和双特异性抗体的迅速度
MonoRab? Rabbit Anti-scFv Cocktail (GenScript, A02282)按1：5000稀释，4℃孵育住宿 ；二抗接纳Mouse Anti-Rabbit IgG Fc Antibody (14H9H10)[HRP], mAb (GenScript, A01856)，1：20000稀释，室温孵育1h 。
三批次MonoRab? Rabbit Anti-scFv Cocktail (GenScript, A02282)对scFv体现出一致的团结曲线，各浓度点CV<10% 。
图9：ELISA检测MonoRab? Rabbit Anti-scFv Cocktail的批次稳固性
scFv包被浓度为1 μg/mL ；MonoRab? Rabbit Anti-scFv Cocktail（GenScript, A02282）从111 ng/mL最先举行3倍梯度稀释 ；检测抗体使用Mouse Anti-Rabbit IgG Fc Antibody (14H9H10) [HRP], mAb (GenScript, A01856)，稀释比例为1：20000 。
竞争ELISA效果显示Anti-scFv抗体在与scFv的团结后并不影响scFv对其靶抗原的团结 。
图10：Anti-scFv抗体与scFv或双特异性抗体的团结并不影响scFv或双特异性抗体对其靶抗原的团结活性
Antigen #1、Antigen #2和Antigen #3包板后，将A02282与Humanized scFv #1、Mouse scFv #2或Bispecific antibody #3混淆后加入孔板中反应，随着A02282浓度的提高，Humanized scFv #1、Mouse scFv #2或Bispecific antibody #3对其靶抗原团结能力并没有显著转变，相比于未加入A02282的转变幅度在80%-120%之间，批注A02282对scFv团结其响应抗原的影响较小 。靶点及scFv信息如下： Humanized scFv#1:anti-VEGF scFv; Antigen#1:VEGF; Mouse scFv#2: anti-BCMA scFv; Antigen#2: BCMA; Bispecific Antibody#3: anti-CD19×anti-CD3, BiTE; Antigen#3: CD3.
| 产品编号 | 名称 | 数目 | 价钱 | 操作 |
|---|---|---|---|---|
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A02282
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MonoRab? Rabbit Anti-scFv Cocktail |
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￥3150.00 200 μl |
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A02283
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MonoRab? Rabbit Anti-scFv Cocktail [Biotin] |
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￥3150.00 200 μl |
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A02284
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MonoRab? Rabbit Anti-scFv Cocktail [FITC] |
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￥3150.00 200 μl |
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A02285
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MonoRab? Rabbit Anti-scFv Cocktail [PE] |
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￥3150.00 200 μl |
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A02286
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MonoRab? Rabbit Anti-scFv Cocktail [iFluor 488] |
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￥3150.00 200 μl |
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A02287
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MonoRab? Rabbit Anti-scFv Cocktail [iFluor 555] |
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￥3150.00 200 μl |
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A02288
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MonoRab? Rabbit Anti-scFv Cocktail [iFluor 647] |
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￥3150.00 200 μl |
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A02289
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MonoRab? Rabbit Anti-scFv Cocktail [HRP] |
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￥3150.00 200 μl |
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Anti-VHH抗体
| Product Type |
Species Specificity |
Unconjugated | Conjugated | ||||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| HRP | Biotin | iFluor 488 |
iFluor 555 |
iFluor 647 |
PE | FITC | |||
| Anti-Camelid VHH, mAb |
Llama, Camel, Alpaca |
A01860 | A01861 | A01995 | A01862 | A01863 | A01994 | A02227 | A02226 |
| Anti-Humanized VHH, mAb |
Humanized, Llama, Camel, Alpaca |
A02165 | A02167 | A02166 | A02168 | A02169 | A02170 | A02171 | A02172 |
| Anti-Camelid VHH, mAb Cocktail |
Llama, Camel, Alpaca |
A02014 | A02016 | A02015 | A02021 | A02020 | A02019 | A02018 | A02017 |
