实验要领：将通过GS-saRNA-1 (低免疫原性载体) 或GS-saRNA-2 (高免疫原性载体) 两种载体制备的eGFP saRNA (m5C修饰) 100ng ，划分通过LNP和Lipofectamine MessengerMAX (Thermo Fisher) 转染HEK293细胞 ，24小时和48小时后通过荧鲜明微镜视察eGFP表达量。
实验效果：BET9登录网址两种载体制备的eGFP saRNA均有显著的eGFP表达 ，LNP递送的组别表达量更高。
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经筛选与验证的复制酶元件与修饰
整合牢靠元件的即用模板 ，加速交付
增强与延伸的卵白表达能力
更少量的mRNA即可实现更强更长期的卵白表达
多种载体支持多元化应用
差别免疫原性的载体可选
| 线性mRNA | 自扩增RNA | 环状RNA | |||||
| 示意图 |  |
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| 结构 | 线性 ，开放5'和3'端 ，易被核酸外切酶降解 | 线性 ，开放5'和3'端 ，易被核酸外切酶降解 | 闭环结构 ，无开放的5'端和3'端 不易被核酸外切酶降解 |
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| 核糖体招募 | 5'Cap: 启动翻译 ，使mRNA更稳固 |
5'Cap: 启动翻译 ，使mRNA更稳固 |
核糖体进入位点 (IRES): 启动翻译 |
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| ORF |
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| UTR | 5'端和3'端的UTR结构提升mRNA的稳固性 ，增进mRNA翻译 | 5'端和3'端的UTR结构提升mRNA的稳固性 ，复制酶增进mRNA的自我复制 | 包括IRES+PIE+其他元件 | ||||
| PolyA尾 | 提升mRNA的稳固性 ，阻止mRNA降解 | 提升mRNA的稳固性 ，阻止mRNA降解 | 不需要 | ||||
| 卵白表达量 | 强+++ | 强+++++ | 强++++ | ||||
| 卵白表达半衰期 | 短 | 更长 | 长 | ||||
| 免疫原性 | 低 | 高 | 中等 | ||||
| 所需剂量 | 高 | 低 | 中等 | ||||
| 立异性 | 古板 | 新 | 更新 | ||||
| 效劳名称 | 目的序列长度 | 交付量* | 纯化方法& | 载体# | 修饰 | 溶剂 | QC | saRNA 制备周期 |
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| 自扩增RNA | 100bp - 6kb | 100μg至200mg | LiCl | GS-saRNA-1 GS-saRNA-2 |
m5C或不修饰 | Sodium citrate, pH6.5 (默认0.5-2mg/ml) |
研究级-标准 研究级-升级 |
快至2周 |
* 单批次交付量 ，总体交付量高达g级别
& 其他纯化方法接待请详询
# 差别载体匹配差别应用
| 载体名称 | 加帽类型 | 修饰类型 | 下游应用 |
|---|---|---|---|
| GS-saRNA-1 | Cap-AU | m5C或不修饰 | 要求免疫原性较量低的应用 ，例如：基因疗法等 |
| GS-saRNA-2 | Cap-AG | m5C或不修饰 | 要求免疫原性较量高的应用 ，例如：肿瘤/熏染病疫苗等 |
| saRNA现货产品 | 修饰 | 规格 | 浓度 | 溶剂 | 周期 |
|---|---|---|---|---|---|
| eGFP / F-Luc / mCherry saRNA | m5C | 50 / 100 / 200μg | 1 mg/ml | 1mM Sodium citrate, pH6.5 | 快至4天 |
| QC | 项目 | 检测方法 | 检测标准 | 研究级 - 标准 | 研究级 – 升级 |
|---|---|---|---|---|---|
| 判断 | 外观 | 视觉视察 | 澄清无异物 ? | ||
| RNA长度 | 毛细管电泳 (CE) | 目的长度±30% | |||
| RNA长度 | 琼脂糖凝胶电泳 | 检测到目的巨细的条带 | |||
| Poly(A)长度 | 酶切法和CE | 目的长度±30% | |||
| RNA含量 | 紫外吸收 | 目的含量±5% ? | |||
| pH | pH计 | 目的值±0.5 | |||
| 缓冲液规格 | 按客户提供详情 | N/A | |||
| 纯度 | A260/280 ? | UV检测 | 1.70 ~ 2.30 | ||
| 加帽效率 | LC-MS | ≥ 90% | |||
| 纯度 | 毛细管电泳 (CE) | ≥ 70% | |||
| 杂质 | 内毒素 | 半定量 | < 10 EU/mg? |
实验要领：将通过GS-saRNA-1 (低免疫原性载体) 或GS-saRNA-2 (高免疫原性载体) 两种载体制备的eGFP saRNA (m5C修饰) 100ng ，划分通过LNP和Lipofectamine MessengerMAX (Thermo Fisher) 转染HEK293细胞 ，24小时和48小时后通过荧鲜明微镜视察eGFP表达量。
实验效果：BET9登录网址两种载体制备的eGFP saRNA均有显著的eGFP表达 ，LNP递送的组别表达量更高。
实验要领：将表达eGFP的200ng线性mRNA ，200ng环状RNA和100ng saRNA通过LNP转染HEK293T细胞。
实验效果：saRNA组的eGFP卵白表达量更高。较之线性mRNA和环状RNA ，saRNA仅需1/2的质量 ，或1/5的摩尔量即可抵达更高的卵白表达量。
实验效果：BET9登录网址saRNA基于GS-saRNA-1载体合成 ，m5C修饰 ，具有差别的经由筛选验证的复制酶元件和修饰 ，与通例saRNA 较量 ，BET9登录网址设计的GS-saRNA 具有更高的初始及一连卵白表达量 ，表达量可以高达10倍。
实验效果：
